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探討elisa試劑盒的免疫沉淀技術(shù)

更新時間:2022-07-22點擊次數(shù):732
   elisa試劑盒具有特異性強,準確度高,檢查速度快等多方面的特點。在食品藥品監(jiān)督管理局,進行食品檢查的時候,可是有效的快速的檢測出結(jié)果,看檢測食品是否符合要求。elisa試劑盒的檢測速度比國標法快速,且敏感性高、特異性強,結(jié)果分析簡單。
  elisa試劑盒能便于滲透入組織細胞內(nèi),且未發(fā)現(xiàn)嚴重的物理吸附現(xiàn)象。在PPA實驗中稀釋液常用含0.5%(v/v)Tween20的0.02mol/L Ph 7.4 Tris-HC1緩沖液。用特殊的微孔板作為測定板,elisa試劑盒用親和素包被微孔板,然后用生物維生素標記探針的3端,再通過該生物維生素和包被在微孔板上的親和素發(fā)生連接,將探針固定在微孔板上,形成一個固相捕獲系統(tǒng)。
  擴增時引物用抗原標記,這樣擴增產(chǎn)物中就會滲入抗原。
  PCR擴增產(chǎn)物與微孔板上的探針雜交,從而捕獲被測靶序列,由于擴增產(chǎn)物中已經(jīng)滲入抗原,在微孔中加入HRP標記抗體后,酶標抗體就與靶序列的抗原免疫結(jié)合,后加入酶底物進行酶促顯色,elisa試劑盒通過光密度測定實現(xiàn)定量。
  PCR-ELISA比PCR本身在病毒分型,基因多態(tài)性分析與克隆鑒定等方面有其*的優(yōu)勢。另外,不應(yīng)用同位素標記,因而避免了放射性帶來的危害,而且整個實驗周期僅需6h左右,操作簡便,可用于大量標本的檢測。盡管與熒光素染色凝膠電泳相比較,PCR-ELISA檢測結(jié)果的特異性,靈敏性和準確性有顯著的提高,但是ELISA試劑盒基本上是一個開放性的反應(yīng)系統(tǒng),特別是在洗滌大鼠ELISA試劑盒反應(yīng)板時,很容易造成污染,從而引起假陽性。因此,在PCR-ELISA整個實驗過程中,必須進行嚴格的無菌操作,同時,PCR-ELISA對PCR產(chǎn)物和探針的雜交條件要求嚴格。

TEL:021-61210612

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