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豬瘟病毒(CSFV)核酸試劑盒廠家

產品簡介

皮生長因子反應蛋白2抗體Baohuoside II中文名:別名:Ikarisoside A分子式:C26H28O10

Bax相互作用因子1抗體Blumeatin中文名:別名:分子式:C16H14O6

巴爾得-別德爾綜合征相關蛋白12抗體Ombuin中文名:商陸素

更新時間:2021-03-13
訪問次數:843
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注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

 產品名稱

 豬瘟病毒(CSFV)核酸試劑盒廠家

 規(guī)格

 48T

 貨號

 LZP7986

組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
硝酸鈰銨Phospho-Stathmin (Ser38) (D19H10) Rabbit mAb喹啉

鹽酸萘二Phospho-Stathmin (Ser38) (D19H10) Rabbit mAb異丁酰

副品紅,付玫瑰Cripto (D81B12) Rabbit mAb (Human Specific)甲酰甲酸

吲哚酸(IAA)Sox1 Antibody順式-1,2-二羥甲基

葉酸(標準品)Sox2 (L73B4) Mouse mAb巴豆

葉酸SignalSlide® Mouse PD-L1 IHC Controls1-基-1-環(huán)羧酸

托法替尼;CP-690550LIN28B Antibody鄰二甲

1-萘酸(NAA);α-萘酸PSMD14 (D18C7) Rabbit mAb2-硝基芐

變色酸2RIL-2Rβ Antibody2-甲

2,二氧酸Cleaved Caspase-1 (Asp297) (D57A2) Rabbit mAb6-喹啉

鉬酸Cleaved Caspase-1 (Asp297) (D57A2) Rabbit mAb甲基喹啉

磺酸;對氨基磺酸Rig-I (D33H10) Rabbit mAb7-甲基喹啉

甘氨酸p75NTR (D8A8) Rabbit mAb(氨基磺?;?酸

甘氨酸(Sigma)Insulin/IGF-1 Signaling Pathway Antibody Sampler Kit酰

L-甘氨酸(標準品)YB1 (D299) Antibody2-氨基酮

DL-苦杏仁酸Eg5 (4H1F12) Mouse mAb甲酰

抗壞血酸;維生素CFastScan™ Phospho-CREB (Ser133) ELISA Kit丁縮二

維生素C(標準品)NMDA Receptor 2A (GluN2A) Antibody2-喹唑啉

5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒VAMP-3  囊泡相關膜蛋白3100 ul

5'-AMP活化蛋白激酶α-2催化亞基(PRKAA2)ELISA試劑盒VAP1  血管粘附蛋白1100 ul

Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA試劑盒VASH1  血管抑制蛋白120 ul

4-羥基壬酸(HNE)ELISA試劑盒VHL/HRCA1  VHL腫瘤抑制因子100 ul

Ⅲ型前膠原氨基末端肽(PⅢNP)ELISA試劑盒VASP  血管擴張刺激蛋白100 ul

Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)ELISA試劑盒Phospho-VASP (Ser157)  酸化血管擴張刺激蛋白100 ul

Ⅲ型前膠原C端肽(PⅢCP)ELISA試劑盒Phospho-VASP (Ser239)  酸化血管擴張刺激蛋白100 ul

Ⅲ型前膠原(HPCⅢ)ELISA試劑盒VAT  囊泡酰膽通道20 ul

Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA試劑盒VCAM-1/CD106  血管內皮細胞粘附分子100 ul
豬瘟病毒(CSFV)核酸試劑盒廠家表皮生長因子反應蛋白2抗體Baohuoside II中文名:別名:Ikarisoside A分子式:C26H28O10

Bax相互作用因子1抗體Blumeatin中文名:別名:分子式:C16H14O6

巴爾得-別德爾綜合征相關蛋白12抗體Ombuin中文名:商陸素別名:商陸黃素; Ombuine分子式:C17H14O7

BTB/POZ結構域蛋白3抗體7,4'-Dihydroxy-3'-prenylflavan中文名:別名:分子式:C20H22O3

BTB/POZ結構域蛋白10抗體Kaempferol 7-O-rhamside中文名:酚-7-O-鼠李糖苷別名:分子式:C21H20O10
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

 

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